細菌生長的zui高、zui適和zui低溫度，常常是某些細菌鑒定的特征之一。測定細菌的生長溫度，要求培養液十分清晰（如普通肉湯培養液），并采用液體菌種直針接種（不用接種環接種）。放置于恒溫水浴培養。指示溫度計應放在同樣的試管和培養基內，在溫度下培養2－5d，觀察生長情況。在接近0℃的低溫培養，則觀察時間可延長至7－10d，甚至30d。
    觀察記錄結果：
目測生長情況，與未接種的空白培養基對比，注意混濁度、沉淀物和懸浮物等項，并分級記錄如下：
（1）“＋“：表示生長良好；與對照管相比，可清楚地判定是混濁的。
（2）“＋－“：表示生長差；與對照管相比，只有在某一觀察角度時方能看到明顯的混濁。
（3）“－“：表示不生長；在適宜的角度下觀察，與對照無差異。
    總之，培養5d，能生長者均按生長計，否則按不生長計，凡培養5d仍屬可疑者或不生長者必須重測，在重測時，可能出現有時生長，有時不生長的不穩定現象，這可能有兩種原因：一種是水浴溫度不穩定，培養時溫度波動大；另一種原因可能是所測定的溫度，恰好是測定菌的臨界生長溫度，在這種情況下，可用提高一度或降低一度的辦法肯定之。
必須注意，當測定的試管較多時，不可將試管捆成一捆浸于水浴中，這樣捆著的試管內外溫度不一致，易出現誤差。用特制試管架放試管，所用溫度計應用標準溫度計標定過。